Indhold
Kromatografiske teknikker udføres i videnskabelige laboratorier for at adskille kemiske forbindelser fra en ukendt prøve. Prøven opløses i et opløsningsmiddel og strømmer gennem en søjle, i hvilken den adskilles ved tiltrækning af forbindelsen mod søjlens materiale. Denne polære og ikke-polære tiltrækning til søjlematerialet er den aktive kraft, der får forbindelserne til at adskille sig over tid. De to typer kromatografi, der anvendes i dag, er gaskromatografi (GC) og højtydende væskekromatografi (HPLC).
Mobil transportørfase
Gaskromatografi fordamper prøven, og den føres langs systemet af en inert gas, såsom helium. Brug af brint giver bedre adskillelse og effektivitet, men mange laboratorier forbyder brugen af denne gas på grund af dens antændelige karakter. Ved anvendelse af flydende kromatografi forbliver prøven i sin flydende tilstand og skubbes gennem søjlen under høje tryk af forskellige opløsningsmidler, såsom vand, methanol eller acetonitril. Forskellige koncentrationer af hvert opløsningsmiddel vil påvirke kromatografien af hver forbindelse forskelligt. Når prøven forbliver i dens flydende tilstand, øges forbindelsens stabilitet.
Kolonnetyper
Gaskromatografisøjler har en meget lille indre diameter, og deres længde kan variere fra 10 til 45 meter. Disse silicabaserede søjler er opviklet langs en cirkulær metalramme og opvarmet til en temperatur på 250 grader Fahrenheit. Flydende kromatografisøjler er også silicabaseret, men har et tykt metalhus for at modstå store mængder internt tryk. Disse søjler fungerer under stuetemperatur og spænder fra 50 til 250 centimeter i længden.
Forbindelse stabilitet
Ved gaskromatografi fordampes prøven, der indsprøjtes i systemet ved ca. 400 grader Fahrenheit, før den føres gennem søjlen. Forbindelsen skal således være i stand til at modstå varme ved høje temperaturer uden at nedbrydes eller nedbrydes til et andet molekyle. Flydende kromatografiske systemer giver forskeren mulighed for at analysere større og mindre stabile forbindelser, fordi prøven ikke udsættes for varme.