Som det er tilfældet, når du bruger et videnskabeligt instrument, skal du sørge for, at instrumentet er i god stand, før du bruger det til at analysere en prøve. Kontroll af instrumentets respons for en kendt prøve verificerer, at instrumentet er korrekt kalibreret. Spektrofotometre kræver periodisk kalibrering for at sikre korrekt respons af instrumentet. Infrarøde (IR) spektrofotometre bruger polystyren som en kalibreringsstandard. En scanning af instrumentet med et stykke polystyren i prøveholderen vil verificere tilstedeværelsen af toppe, der er set på IR-spektre, og den relative intensitet af toppe.
Tænd for spektrofotometret, og lad det varme op i mindst 10 minutter. Opvarmningstiden kræves for, at kilden stabiliseres. Uden en stabil kilde kan du ikke stole på de opnåede spektre. Det analytiske signal er afhængig af dæmpningen af kildestrålingen af prøven.
Kør kalibreringsstandarden ved at placere et stykke polystyrenfilm i prøveholderen. Uden en testkørsel ved hjælp af en prøve af kendte spektre kaldet en standard, er du ikke sikker på, at spektrofotometeret fungerer korrekt.
Hent spektrene for polystyrenprøven. Sammenlign spektrene med det i en standardreference for IR-spektre. Sørg for, at alle de forventede toppe findes på testspektre. Toppenes placering skal være på linje med bølgelængden af absorption.
Kontroller spektrene for at sikre dig, at signalets styrke er inden for 95 procent af det maksimale for den stærkeste top. Hvis den stærkeste spids i spektrene er mere eller mindre end fuld skala, skal du justere dæmpningen for at levere den rigtige signalstyrke.
Kalibrer IR-spektrofotometeret ofte. En minimum kalibreringsfrekvens bør omfatte en scanning lige før og en lige efter dit arbejde på dagen.