Et enzym er et protein, der katalyserer (øger hastigheden af) kemiske reaktioner. Den optimale temperatur for de fleste enzymer eller temperaturen, hvor enzymer bedst muliggør reaktioner, er mellem 35 og 40 grader Celsius. At øge temperaturen inden for dette vindue øger reaktionshastigheden, fordi det ophidser molekyler og øger hastigheden, hvormed enzymer / reaktanter kolliderer og reagerer for at fremstille produkt. At forøge temperaturen for meget kan dog denaturere enzymet og forhindre det i at arbejde overhovedet.
Bestemm den optimale enzymtemperatur ved at opvarme reaktionen med uendelige mængder og tage små prøver af reaktionen for at bestemme, hvornår den maksimale produktionshastighed forekommer.
Vælg en metode. Bestem, hvordan du skal måle koncentrationen af dit produkt på forskellige punkter i eksperimentet. For eksempel kan du måle koncentrationen af mange produkter ved hjælp af et spektrofotometer og beregne koncentrationen ud fra absorbansen, eller ved at måle fluorescens og beregne koncentrationen ud fra fluorescens.
Indstil dit eksperiment. Anbring dine reaktanter og enzym i en lille beholder med et låg, f.eks. Et scintillationshætteglas. Reaktionen begynder. Placer scintillationshætteglasset i et større bægerglas med stuetemperaturvand. Placer bægerglaset på en varmeplade. Placer et termometer inde i bægerglaset. Dette giver dig mulighed for at måle reaktionens temperatur på forskellige punkter.
Tag en prøve på 100 mikroliter af reaktionen ved stuetemperatur, ca. 25 grader Celsius. Tænd varmepladen. Ved forskellige temperaturer mellem 30 og 40 grader celsius (30,5, 31, 31,5 osv.) Tag 100 mikroliter prøver af din reaktion.
Bestem koncentrationen af dit produkt ved hver temperatur. Når temperaturen stiger over 40 grader celsius, vil du se et fald i hastigheden, hvormed underlaget omdannes til produkt, fordi enzymet denatureres. Det punkt, hvorpå produktet produceres med den maksimale hastighed, er det punkt, hvor temperaturen er på sit optimale.