Indhold
Forskere og forskere studerer bakterievækst ved at forberede kulturer i et laboratorium. Petriskåle indeholdende næringsagar dyrker bakteriekulturer fra en enkelt svejse eller inokulering. Studerende kan forberede næringsagar derhjemme ved hjælp af forsyninger fra købmands- eller helsekostbutikker til et videnskabsmesse projekt. Konventionelle køkkenapparater og grundlæggende køkkenudstyr giver værktøjerne til at fremstille et sterilt kulturmedium, der kan udleveres i petriskåle. Ved at følge sterile teknikker ved at opvarme materialerne og holde overfladerne rene og tørre, vil resultaterne forbedres ved at forhindre mug og partikler i at forurener kulturen.
Læg et kaffefilter i en sil, og hæng silen over åbningen af den klare skål.
Hæld langsomt bouillon i filteret, og sørg for, at bouillon ikke løber over fra siderne af filteret. Hvis filteret bliver tilstoppet med partikler, skal du fjerne det brugte filter, udskifte med et rent filter og fortsætte med at hælde bouillon.
Fjern silen og filteret fra toppen af skålen, og observer om bouillonen synes klar (dvs. der er ingen suspenderede partikler i væsken). Hvis partikler flyder i væsken, gentages trin 1 og 2 ved hjælp af en anden klar skål og et frisk kaffefilter.
Læg gryden på ovnen, og hæld den klare bouillon i gryden.
Tilsæt 16 ounces destilleret vand til gryden, der indeholder bouillon.
Tænd for ovnen, og juster varmen til medium-lav. Opvarm bouillonen til en simmer (dvs. små bobler vises nær siden af gryden).
Tilsæt 1 tsk agar-agar-pulver til den simmerende bouillon (ca. 2,5 gram), og omrør blandingen, indtil pulveret er opløst. Sørg for at røre pulveret op for at opløse og forhindre, at gelatinen synker ned i bunden af gryden (hvor det kan brænde).
Gentag trin 7, indtil alt agar-agar-pulver er opløst i bouillon.
Fortsæt med at omrøre bouillon i ca. 1 minut for at sikre, at alt pulver er helt opløst.
Sluk for ovnen, læg låget på gryden, og lad væsken afkøle i mindst 15 minutter.
Arranger de sterile petriskåle i træk for let montering, men fjern ikke låg. Hvis det ønskes, skal du placere en bagatel for at holde den varme gryde. Hvis du bruger lokkede vaniljesaus i stedet for petriskåle, steriliserer vanillecremen ved at placere kopperne og lågene omvendt (på hovedet) på et foliedækket cookieark og bages i ovnen i mindst en time ved 375 grader Fahrenheit. Sørg for, at de steriliserede kopper og låg er kølet helt inden brug.
Rør forsigtigt på ydersiden af gryden for at kontrollere, at den er varm at røre ved, og placér gryden på trillet. Hvis gryden er for varm til at røre ved, skal du vente mindst 10 minutter, så gryden afkøles.
Fjern låget og sæt det til side. Læg øjen i gryden.
Fjern låget fra en petriskål, og dispens næringsmedium for at fylde skålen halvvejs. Dæk skålen med det samme.
Gentag trin 14 for hver petriskål.
Lad næringsmediet stivne i petriskålene i mindst 1 time uforstyrret.
Ryst forsigtigt petriskålene side til side for at kontrollere, at næringsmediet er fuldstændigt størknet. Hvis bouillon ikke er fuldstændigt geleret, skal du vente yderligere 20 minutter, før du kontrollerer igen.
Dæk et bord eller en flad overflade med en rulle papirhåndklæder for at skabe et sterilt arbejdsområde. Riv et ark papirhåndklæde af, og fold det fire gange for at skabe en tyk, rektangulær vatt. Indstil denne wad i den ene ende af arbejdsområdet.
Overfør en petriskål til det sterile arbejdsområde, og fjern låget. Vend forsigtigt skålen, og anbring den ene ende på siden af den foldede tromme, så den ligger omvendt og let vinklet (med et let hul ved papirhåndklædeservatet).
Vend låget om, og anbring det over petriskålen på den sterile arbejdsoverflade. Hvis der vises vanddråber på låget, skal du riste denne fugt forsigtigt af, inden du placerer den på den overdækkede overflade, men rør ikke ved indersiden af låget.
Gentag trin 19 og 20 for hver petriskål, og placer den ene side af den omvendte skål på siden af den forrige skål i stedet for papirhåndklædeservatet. Opvaskene vises som et forskudt sæt med huller på den ene side, så overskydende fugt kan fordampe.
Se på de omvendte petriskåle for at kontrollere, om fugtigheden på siderne af pladerne fordampede. Når al fugt er fjernet, skal du dreje pladerne højre side op og dække straks med lågene til brug.
Inokuler næringsagaren på pladen ved at tørre en vatpind indeholdende den ønskede kultur på næringsagaroverfladen, inden den dækkes med låg. Vend petriskålen, så faststoffet er på toppen. Opbevar den inokulerede petriskål med det faste stof på toppen til dyrkning og låg på bunden for at fange fugt, løse partikler eller vækst.