Indhold
Kemikere bruger ofte et instrument kendt som et ultraviolet-synligt eller UV-Vis-spektrometer til at måle mængden af ultraviolet og synlig stråling absorberet af forbindelser. Mængden af ultraviolet eller synlig stråling, der absorberes af en forbindelse, afhænger af tre faktorer: koncentration, c, af prøven; stien længde, l, for prøveholderen, der bestemmer afstanden, som prøven og strålingen interagerer i; og koefficienten for molabsorption, e, som undertiden benævnes den molære ekstinktionskoefficient. Ligningen er angivet som A = ecl og er kendt som Beer's law. Ligningen indeholder således fire variabler, og for at bestemme en af de fire kræves kendte værdier for tre.
Beregninger
Bestemm absorbans for forbindelsen ved den ønskede bølgelængde. Denne information kan ekstraheres fra absorbansspektret produceret af ethvert standard UV-Vis instrument. Spektrene er normalt afbildet som absorbans vs. bølgelængde i nanometer. Generelt indikerer udseendet af alle "toppe" i spektret bølgelængderne af interesse.
Beregn koncentration af prøven i mol pr. Liter, mol / L, også kendt som molaritet, M. Den generelle ligning for molaritet er
M = (gram prøve) / (molekylvægt af forbindelse) / liter opløsning.
For eksempel vil en prøve indeholdende 0,10 gram tetraphenylcyclopentadienon med en molekylvægt på 384 gram pr. Mol opløst og fortyndet i methanol til et slutvolumen på 1,00 liter udvise en molaritet på:
M = (0,10 g) / (384 g / mol) / (1,00 L) = 0,00026 mol / L.
Bestem sti-længden gennem prøveholderen. I de fleste tilfælde er dette 1,0 cm. Andre sti-længder er mulige, især når der er tale om prøveholdere beregnet til gasformige prøver. Mange spektroskopister inkluderer sti-længden med prøveinformationen, der er redigeret for absorbansspektret.
Beregn koefficienten for molabsorption i henhold til ligningen A = ecl, hvor A er absorbans, c er koncentration i mol pr. Liter og l er banelængde i centimeter. Løst for e bliver denne ligning e = A / (cl). Fortsætter eksemplet fra trin 2 udviser tetraphenylcyclopentadienon to maksima i dets absorbansspektrum: 343 nm og 512 nm. Hvis sti-længden var 1,0 cm og absorbansen ved 343 var 0,89, så
e (343) = A / (cl) = 0,89 / (0,00026 * 1,0) = 3423
Og for absorbansen på 0,35 ved 512 nm,
e (512) = 0,35 / (0,00026 * 1,0) = 1346.