Indhold
- Let mikroskopi og cellebiologi
- Der er udviklet snesevis af eksperimentelle procedurer
- Kemiske pletter og let mikroskopi
- Let zoom
- Fordele ved fluorescerende mikroskopi
- Ulempe ved lette mikroskoper
Det lys eller sammensatte mikroskop er et værktøj, som enhver biologistudent sandsynligvis vil støde på. At forstå fordelene ved lysmikroskopet giver indblik i at mestre dets anvendelighed i klasseværelset eller klinikken. De mange eksperimentelle teknikker, der er perfektioneret til brug med et lysmikroskop, dets brugervenlighed og dets relativt overkommelige pris sammenlignet med andre typer mikroskoper, gør det til det foretrukne valg til mange life science-applikationer.
Let mikroskopi og cellebiologi
Da celler ikke kan ses med det ikke-hjælpede øje, er mikroskopi en nøglekomponent til undersøgelse af cellestruktur og funktion. Et lysmikroskop bruger en lyskilde til at belyse prøven på et lyst felt. Prøven er farvet for at gøre strukturer, der normalt er gennemskinnelige eller næsten farveløse mørkere end baggrunden og lettere at se. En anden mikroskopi-teknik er fluorescerende mikroskopi. I stedet for at bruge en mørk plet på en lys baggrund farves celler med fluorescerende farvestoffer og ses på en mørk baggrund.
Der er udviklet snesevis af eksperimentelle procedurer
Undersøgelse af væv med lysmikroskopi har været praktiseret i mere end 50 år. Lysmikroskopi er den mest tilgængelige form for mikroskopi i hele verden og stadig et af de vigtigste træningsredskaber til patologer eller læger, der diagnosticerer sygdomme ved at undersøge mikroskopisk vævsstruktur. Tusinder af laboratorier over hele verden har perfektioneret snesevis af eksperimentelle procedurer, og mange af dem stilles frit til rådighed. Kombinationen af lave omkostninger og den store mængde biologisk information, som et lysmikroskop giver, gør det til et uvurderligt værktøj til forskning og medicin.
Kemiske pletter og let mikroskopi
Iagttagelse af en prøve under lysmikroskopi kræver hjælp af farverige kemiske pletter. Disse blå, røde, grønne og brune pletter fastgøres på vævet med et klart kemikalie kaldet permount, som hærder, når de udsættes for luft. Således kombineres disse kemiske pletter og væv i mange år uden at falme, hvilket gør det muligt for forskere at undersøge det samme prøve i lang tid uden tab af farve. Tab af synlighed er en begrænsning af fluorescensmikroskopi, fordi de fluorescerende farvestoffer falmer over tid.
Let zoom
Det sammensatte mikroskops evne til let at zoome mellem at observere halen af en lille fisk ved 50 gange dens faktiske størrelse til at se arterierne i halen på 400 gange den faktiske størrelse er uovertruffen af andre typer mikroskoper. Patologer undersøger biopsier eller små stykker væv fjernet med en nål under et sammensat mikroskop og zoomer ind og ud ofte for at gøre deres bedste vurdering. Det sammensatte lysmikroskop forbliver den bedste mulighed for denne type forskning.
Fordele ved fluorescerende mikroskopi
Fluorescerende mikroskopi giver større visuelle detaljer for seeren, fordi fluorescerende farvestoffer kan målrette mod specifikke strukturer i cellen. Fluorescerende molekyler i celleprøven kaldet fluoroforer absorberer lys ved en bølgelængde og udsender lys en anden bølgelængde. Fluorescerende farvestoffer kan bruges sammen med specifikke proteiner og antistoffer til at fremhæve strukturer og endda enkeltmolekyler i cellen. Fluorescerende mikroskopiteknikker gør det muligt at anvende flere farvestoffer i en prøve.
Ulempe ved lette mikroskoper
Mikroskopiteknologi har eksploderet i de seneste årtier, hvor nogle af de mere avancerede mikroskoper leverer mere detaljerede oplysninger end det klassiske sammensatte (lette) mikroskop. Fluorescerende mikroskoper giver forskere mulighed for at se to forskellige proteiner på samme sted i en celle ved hjælp af røde og grønne markører, der overlapper hinanden og danner en gul farve. Elektronmikroskoper viser de tredimensionelle træk ved en celleoverflade. For at nævne en ulempe ved lysmikroskopet har det ikke nogle af de avancerede egenskaber ved fluorescerende eller elektronmikroskopi, fordi det kun bruger hvidt lys. Elektronmikroskoper og fluorescerende mikroskoper varierer imidlertid i pris fra titusinder til hundreder af tusinder af dollars, mens et sammensat mikroskop i øjeblikket kan købes for så lidt som $ 100.