Indhold
- Bedre visualisering
- Identifikation og klassificering
- Påvisning af levedygtighed
- Identifikation af cellulære strukturer
Mikrobiologer studerer egenskaberne ved mikroorganismer såsom alger, protozoer, bakterier, svampe og vira ved hjælp af et mikroskop. Mens nogle organismer, såsom protozoer og gærceller, er lette at observere under anvendelse af en våd montering, kræver bakterieceller farvning. Forskere udviklede adskillige metoder, såsom Gramfarvning, syrehurt farvning og fluorescerende farvning for bedre visualisering af bakterieceller og cellulære strukturer. Ved hjælp af sådanne farvningsmetoder er det muligt at identificere strukturelle træk, der hjælper med at klassificere bakterier.
Bedre visualisering
Bakterielle organismer er så små, at de fleste af dem kun er synlige under et mikroskop med en forstørrelsesstyrke på 1000X. Blot forstørrelse af størrelse tilvejebringer imidlertid ikke en tilstrækkelig grad af klarhed, således at bakterier derfor skal farves før observation for at tilvejebringe den klarhed, der er nødvendig til visualisering.
Identifikation og klassificering
Farvning af bakterier for at skelne mellem bakterietyper er kendt som differentiel farvning. Gram-pletten er en sådan forskellig plet, der skelner mellem bakterier på grundlag af deres cellevægsindhold. Ved denne metode reagerer bakteriecellerne med en krystalviolet plet for at optage en violet farve. Når der tilføjes et affarvningsmiddel, mister nogle bakterieceller farve, mens andre ikke gør det. Når der tilføjes safraninfarvning, optager de affarvede celler pletten til at se rød ud, mens de bakterieceller, der ikke mistede farve, forbliver violette. De bakterieceller, der optager den røde farve, kaldes Gram-negative organismer, og de, der ikke optager farven, klassificeres som Gram-positive organismer. Gramfarvning tilvejebringer en hurtig metode til initial identifikation af bakterier involveret i infektioner. På lignende måde hjælper den syrehurtige farvningsprocedure med specifikt at identificere organismerne, der tilhører klassen af bakterier kaldet Mycobacteria, såsom Mycobacterium tuberculosis.
Påvisning af levedygtighed
I bakteriekulturprøver er det ofte vigtigt at detektere tilstedeværelsen af levende bakterieceller. Farvningsmetoder såsom fluorescerende farvning hjælper med at identificere, om kulturceller er levedygtige eller ikke. Levende bakterier har evnen til at omdanne 5-Cyano-2,3-ditolyl Tetrazolium Chloride (CTC) farve til et farvestof, der viser en rød fluorescens. Når kulturer farvet med CTC udsender en sådan fluorescens, angiver det derfor tilstedeværelsen af levedygtige bakterier. Propidiumiodid er en plet, der kun virker på ikke-levende celler, der har beskadigede membraner, og derfor er nyttig til at identificere døde bakterieceller.
Identifikation af cellulære strukturer
Farvning tilvejebringer en metode til tydelig visualisering af flere cellulære strukturer. F.eks. Tillader Fuelgen-farvningsmetoden identifikation af kernen i bakterieceller, medens Alberts plet er nyttigt til visualisering af metachromatiske granuler. Tilsvarende tillader sølvimprægneringsteknikken identifikation af spirocheter. Flagella er lette at observere, når de farves med Ryu's plet. Malakitgrøn farvning hjælper med at identificere bakteriesporer.